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养细胞注意点(一)

点击次数:98 发布时间:2019/4/23 17:43:42

 

                      养好细胞注意点(一)

     (一)冷冻管应如何解冻 

 

取出冷冻管后,须立即放入 37 ℃ 水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在 1 分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管的爆裂。


(二)细胞冷冻管解冻培养时,DMSO如何处理

 

在细胞解冻之后,可直接离心去除DMSO,用新鲜的培养基悬浮后直接放入含有 新鲜培养基的培养角瓶中进行细胞培养,如此可避免解冻后细胞生长受到DMSO影响。

 

(三)可否使用与原先培养条件不同的培养基

 

每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基,若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活,不应该马上替换。

 

(四)可否使用与原先培养条件不同的血清种类

 

血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。

 

(五)何谓 FBS,FCS,CS,HS

 

FBS (fetal bovine serum) 和 FCS (fetal calf serum) 是相同的意思,两者都是指胎牛血清。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。

 

(六)培养细胞时应使用 5% 或 10% CO2

 

一般培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作为 pH 的缓冲系统,而培养基中 NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的 CO2 浓度。理论当培养基中 NaHCO3 含量为每公升 3.7 g 时,细胞培养时应使用 10% CO2;当培养基中 NaHCO3 为每公升 1.5 g 时,则应使用 5% CO2 培养细胞。

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